Qingjie Fuzheng Granules regulates cancer cell proliferation,apoptosis and tumor angiogenesis in colorectal cancer xenograft mice via Sonic Hedgehog pathway

BackgroundSonic Hedgehog (SHh) signaling pathway plays a critical role in cell proliferation, apoptosis, and tumor angiogenesis in various types of malignancies including colorectal cancer (CRC). Qingjie Fuzheng Granules (QFG) is a traditional Chinese medicinal formula, which has been clinically used in various cancer treatments, including CRC. In this study, we explored the potential molecular mechanisms of QFG treatment effects on CRC via the SHh pathway.MethodsA CRC HCT-116 xenograft mouse model was utilized for all experiments. Mice were treated with intra-gastric administration of 1 g/kg of QFG or saline 6 days a week for 28 days (4 weeks). Body weight, length and shortest diameter of the tumor were measured every 3 days. At the end of the treatment, the tumor weight was measured. TUNEL staining assays were used to detect tumor apoptosis. Western blot and immunohistochemistry (IHC) assays were used to detect the expression of relative proteins.ResultsIn our results, QFG inhibited the increase of tumor volume and weight, and exhibited no impact on mouse body weight. Furthermore, QFG significantly decreased the expression of SHh, Smo and Gli proteins, indicating the action of SHh signaling. Consequently, the expression of pro-proliferative survivin, Ki-67, Cyclin-D1 and CDK4 were decreased and expression of anti-proliferative p21 was increased. The pro-apoptotic Bax/Bcl-2 ratio, cle-caspase-3 and TUNEL-positive cell percentage in tumor tissues were increased. Meanwhile, the pro-angiogenic VEGF-A and VEGFR-2 expression was down-regulated.ConclusionsQFG inhibited CRC cell proliferation and promoted CRC cell apoptosis and tumor angiogenesis in vivo through the suppression of SHh pathway, suggesting that QFG could be a potential therapeutic drug for CRC.     

原发性肝癌射频消融术后复发预测模型的建立及评价

目的 构建和评价用于预测原发性肝癌（primary liver cancer，PLC）患者射频消融（radiofrequency ablation，RFA） 术后无瘤生存率的列线图模型。 方法 回顾性分析2009年6月至2017年5月于广西医科大学附属肿瘤医院接受射频消融治疗的213例PLC患者的临床资料。ＰＬＣ患者被随机分为训练组（n=133）和验证组（n=80）。采用Cox回归模型分析射频消融术后复发的因素，并建立复发的列线图模型。通过校准曲线评估模型的预测符合度，Kaplan-Meier 曲线评估模型的实用性，一致性指数（C-index）评估模型的准确度。结果 训练组1年、3年、5年无瘤生存率分别为65.25%、40.91%、26.99%，验证组分别为66.29%、48.10%、24.59%，两组生存曲线比较差异无统计学意义（P=0.785）。Cox回归分析结果显示，肿瘤数目（HR=1.921， 95%CI：1.136~3.251）、丙肝抗体阳性（HR=4.545，95%CI：1.700~12.149）、HBV-DNA≥10² IU/mL（HR=1.993，95%CI：1.209~3.284）及血清前白蛋白（HR=0.996，95%CI：0.993~0.999）为无瘤生存率的影响因素。基于肿瘤数目、HBV-DNA和血清前白蛋白等因素建立列线图模型，训练组和验证组的 C-index 分别为 0.649（95%CI：0.588~0.710）、0.641（95%CI：0.556~0.724），校准图形中标准曲线与预测校准曲线贴合良好。采用列线图将患者分为高风险组和低风险组，高风险组无瘤生存率低于低风险组（P<0.05）。结论 基于肿瘤数目、HBV-DNA和血清前白蛋白等因素建立的列线图测模型可预测PLC射频消融术后的无瘤生存率，对患者辅助治疗具有一定指导价值。     

三苯氧胺与来曲唑治疗ER阳性乳腺癌的临床疗效及对血清雌二醇水平和远期预后的影响

目的探讨三苯氧胺与来曲唑治疗雌激素受体(ER)阳性乳腺癌的临床疗效及对血清雌二醇(E2)水平和远期预后的影响。方法采用简单随机抽样法将110例ER阳性乳腺癌患者分为对照组(n=53)和研究组(n=57)。两组患者均接受长春瑞滨联合顺铂治疗,对照组患者在此基础上接受三苯氧胺治疗,研究组患者在此基础上接受来曲唑治疗,随访3年。比较两组患者的临床疗效、血清肿瘤标志物和E2水平、子宫内膜情况、不良反应发生率及生存情况。结果研究组患者的疾病控制率为92.98%,高于对照组的79.25%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者的血清糖类抗原153(CA153)、癌胚抗原(CEA)及E2水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后3个月,两组患者的血清CEA和CA153水平均较本组治疗前降低,且研究组患者的血清CEA和CA153水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后3、6、12个月,研究组患者的血清E2水平均低于治疗前,对照组患者的血清E2水平均高于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。病理结果提示,治疗后对照组中子宫内膜息肉2例,内膜不典型增生1例。两组患者恶心呕吐、便秘、肝肾功能不全、血小板减少、粒细胞减少及白细胞降低的发生率比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。研究组患者的3年生存情况优于对照组(P<0.05)。结论来曲唑治疗ER阳性乳腺癌的临床疗效优于三苯氧胺,且可降低血清肿瘤标志物和E2水平,改善远期预后。     

Occludin在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测非小细胞肺癌（NSCLC）组织中闭合蛋白（Occludin）的表达水平及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测73例NSCLC组织及其配对正常肺组织中Occludin蛋白表达水平，分析Occludin蛋白的表达差异及其与临床病理参数的相关性。结果:Occludin蛋白在肿瘤组织中的阳性表达率显著低于配对正常肺组织（P＜0.05）。Occludin蛋白的表达水平与患者性别、肿瘤大小、淋巴结转移、组织学类型、Ki-67表达水平显著相关。结论:Occludin蛋白表达下调与NSCLC细胞的增殖、转移能力相关，在肿瘤进展中发挥重要作用。     

miR-338通过靶向GPX4抑制非小细胞肺癌细胞增殖

目的:探讨miRNA-338（miR-338）通过靶向调控谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）表达在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)增殖中的作用及机制研究。方法:通过实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测非小细胞肺癌组织、癌旁、细胞系及对照细胞系中miR-338及GPX4 mRNA的表达水平；通过Western Blot检测非小细胞肺癌组织、癌旁、细胞系及对照细胞系中GPX4蛋白水平；通过荧光素酶报告基因时间验证miR-338直接靶向调节GPX4的表达；通过CCK-8探索miR-338是否通过调节铁死亡影响肿瘤细胞增殖;通过试剂盒检测细胞脂质氧化和活性氧水平。结果:NSCLC组织和细胞系中miR-338表达水平低于癌旁组织和对照细胞系；NSCLC组织和细胞系中GPX4 mRNA及蛋白表达水平高于癌旁组织和对照细胞系；Starbase软件分析发现GPX4 mRNA序列中含有miR-338特异作用位点，荧光素酶报告基因实验结果证实miR-338直接靶向调节GPX4表达；过表达miR-338提高肿瘤细胞中脂质氧化及活性氧水平，并抑制肿瘤细胞增殖；而铁死亡抑制剂预处理可以逆转miR-338的抑癌作用。结论:miR-338通过负向调控GPX4表达进而促进肿瘤细胞铁死亡，最终抑制NSCLC细胞增殖。     

WT1基因与急性髓系白血病的预后及主动特异性免疫治疗的研究进展

WT1基因位于人类染色体11p13，在80%的急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）患者中高表达，是AML预后不良的分子标志，可作为AML预后评估和微小残留病变（minimal residual disease，MRD）监测的有效指标。由于WT1在AML中均有异常高表达，故认为是一种AML抗原，可作为特异性免疫治疗的新靶点。一些小规模的临床试验证实以WT1为靶点的免疫治疗是有效的、安全的，这些免疫治疗可作为那些有高危复发风险及初始标准化疗失败的AML患者的辅助治疗。本文就近几年WT1与AML的预后及有关以WT1为靶点的主动特异性免疫治疗的研究进展予以综述。     

腹腔穿刺与腹腔输液港在卵巢癌患者腹腔化疗中的应用比较

目的:探讨腹腔穿刺与腹腔输液港在卵巢癌患者腹腔化疗中的应用效果。方法:选择2017年1月至2018年12月住院行腹腔化疗的卵巢癌患者90例，其中腹腔穿刺组患者45例，腹腔输液港组患者45例。对比2组患者的治疗效果、导管相关并发症发生情况、穿刺时疼痛评分、一次性穿刺成功率以及疗程完成情况。结果:两组患者治疗效果比较差异无统计学意义（P>0.05）；导管相关并发症发生情况，两组比较差异无统计学意义（P>0.05）；腹腔输液港组患者穿刺疼痛评分低于腹腔穿刺组，两组M(P25，P75)评分分别为2.00（1.40，2.50）和5.33（5.00，5.67），差异具有统计学意义（P<0.05），腹腔输液港组患者有18例主诉在留置期间存在腹部异物感；腹腔穿刺组患者一次性穿刺成功率为87.44%（181/207），腹腔输液港组患者为95.04%（249/262），两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）；腹腔穿刺组患者疗程完成率为82.22%（37/45），腹腔输液港组为95.56%（43/45），差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:腹腔输液港相较于腹腔穿刺应用于腹腔化疗中，其一次性穿刺成功率更高，疗程完成度更好，故在经济条件允许且化疗周期较长、腹部穿刺困难或对疼痛不耐受的患者可考虑置入腹腔输液港。     

原肌球蛋白4在胃癌细胞迁移、侵袭和转移中的作用

目的:探索原肌球蛋白4（Tropomyosin4,TPM4）在胃癌细胞的迁移、侵袭和转移中的作用。方法:利用Real-time PCR、Western Blot及免疫荧光，检测原肌球蛋白4在不同胃癌细胞系及正常胃上皮细胞中的表达情况；利用免疫组化，检测原肌球蛋白4在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达情况；利用慢病毒技术，在GC9811-P细胞中，分别转染LV-TPM4、shRNA-TPM4及对照空载体；通过Transwell和体内实验，检测胃癌细胞迁移、侵袭和转移。结果:Real-time PCR、Western Blot及免疫组化结果显示，原肌球蛋白4在胃癌细胞系及胃癌组织中的表达降低；上调原肌球蛋白4的表达后，抑制胃癌细胞的迁移、侵袭和转移；下调原肌球蛋白4的表达后，促进胃癌细胞的迁移、侵袭和转移（P<0.05）。结论:原肌球蛋白4抑制胃癌细胞的迁移、侵袭和转移。     

EZH2在乳腺癌中的差异表达及临床意义

目的:利用整合生物信息学手段分析EZH2（enhancer of zeste 2 polycomb repressive complex 2 subunit）基因在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:在肿瘤基因组计划数据库（The Cancer Genome Atlas，TCGA）中下载乳腺癌与正常乳腺组织的基因表达谱数据，进一步利用Ualcan数据库和人类蛋白质图谱（The Human Protein Atlas）数据库数据分析EZH2基因在乳腺癌中的mRNA及蛋白表达水平。利用Ualcan数据库分析EZH2基因的甲基化水平并筛选其共表达基因；对EZH2及其共表达基因进行GO（Gene Ontology）富集分析和KEGG通路分析以明确EZH2的共表达基因参与的生物学过程和相关通路；使用Kaplan-Meier生存分析法分析乳腺癌患者的总生存期、无病生存期、无远处转移生存期及后进展生存期与EZH2基因表达水平的关系并绘制生存曲线。结果:与正常乳腺组织相比，EZH2在乳腺癌组织中的mRNA及蛋白表达量明显升高。而EZH2的甲基化程度在乳腺癌组织与正常乳腺组织中则差异不明显。同时，EZH2的表达水平与年龄、乳腺癌分期及乳腺癌分子分型等因素密切相关。EZH2及其共表达基因主要参与了核碱基的调节、细胞周期调控、染色体分离、DNA复制、DNA修复等生物学过程，并参与了细胞周期、DNA 复制、M/G1期转化、M期、有丝分裂前中期、ATM通路等生物学通路。此外，EZH2基因表达水平高的乳腺癌患者的总生存期、无病生存期、无远处转移生存期及后进展生存期均明显低于EZH2基因低表达的患者。结论:EZH2在乳腺癌组织中高表达并且与患者不良预后密切相关。同时，EZH2的表达水平与乳腺癌的发生、发展密切相关。EZH2在乳腺癌诊断、靶向治疗及预后分析中具有重要的临床意义。